一、泵的使用和维护
1、防止固体微粒进入泵内。因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞杆、密封环、缸体和单向阀。泵的入口都应连接砂滤棒,输液棒的滤器经常清洗或更换。
2、流动相不应含有任何腐蚀性物质。例如氯仿、丙酮、二氯甲烷等,这些溶剂将会Peek树脂部件变脆;还有含有卤离子的流动相或能产生卤离子的流动相,如果使用了,分析结束后,应立即用去离子水清洗整个管路,因卤离子会腐蚀不锈钢部件或管路。流动相含有缓冲盐不应停泵保留在泵内时间过长,由于蒸发甚至由于溶液的净置就可能析出晶体。
3、泵工作时要注意流动相不要被用完,否则空泵运转会加快磨损柱塞杆和密封圈。输液泵的压力不要太高,否则会使密封圈变形,降低密封圈使用寿命。
4、在使用双泵过程中,如果不是梯度洗脱,尽量先混合。如果一个是有机溶剂,一个是含盐溶液,在用双泵的时候,有可能会析出晶体。
5、在使用缓冲盐作流动相实验结束之前和结束后,都要用含10%甲醇水溶液冲洗管路,不能用纯水冲洗,因纯水会对柱子造成损坏。进样阀要用适宜的溶剂进行清洗。
二、色谱柱的使用和维护
1、避免压力和温度的急剧变化以及机械震动。在进样的时候,进样阀扳手不能转动太慢,更不能停留在中间,如停留在中间,泵内压力剧增,这时再转动到进样位置时,过高的压力会损坏色谱柱。如出现机械震动(掉在地上)则会改变填料的充填状态。
2、在使用色谱柱过程中,不应直接从有机溶剂到水,反之,也不要从水直接改变到有机溶剂。
3、色谱柱一般不能反冲,除非生产者指明。
4、冲洗色谱柱时,每种溶剂至少冲洗50ml。
5、装在机子上的色谱柱,应每隔4~5天冲洗15分钟,可以避免长菌,保护色谱柱。
6、PH的调节尽量在2~9之间
7、保存色谱柱时,柱接头要拧紧。
三、输液泵产生 故障及排除方法
1、没有流动相流出,又无压力显示。原因可能是泵内有大量气体,这时打开排液阀,使泵在较大流量下运转,将气体排出,也可用一个针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个原因使密封圈损坏。
2、压力和流量不稳。原因①可能有气泡;②单向阀污染,可卸下单向阀,浸入异丙醇内超声清洗;③沙滤棒内有杂质或微生物堵塞,可将沙滤棒浸入流动相中超声清洗,也可将滤头放入4mol/l硝酸溶液中,迅速除去微生物。也可能是盐堵塞,可放入水中清洗;④在线过滤器堵塞⑤进样阀损坏;⑥密封圈性能不好。
3、压力过高。①管路堵塞;②保护柱堵塞;③检测池堵塞,发生情况立即停泵,否则会损坏流通池。
四、与检测器有关的故障及其排除
1、流通池内有气泡。如果有气泡连续不断通过检测池,将其噪音增大。如有较大气泡,则会在基线上出现许多线状“峰”,可加大流量排出气体。如果检测池有停留的气泡,可采用突然增大流量的方法排除气体(不连接色谱柱)。
2、检测池被污染。检测池被污染了,可能产生噪音,或基线漂移,可以使用适当溶剂清洗,如果污染严重,就可以用1mol/l硝酸溶液、水和新鲜溶剂进行清洗。
3、光源灯出现故障。检测器的光远灯不能满足正常样品分析时,可能产生严重噪音污染,基线漂移,出现异常峰,甚至基线不回零。
4、出现倒峰。如果流动相有紫外吸收的杂质,使用紫外检测器时,就会产生倒峰,必须用高纯度的溶剂作为流动相。检测器的极性接反了,也会出现倒峰。
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